Cykl życiowy mączniaka prawdziwego zazwyczaj rozpoczyna się od konidiów lub askospor lądujących na roślinie żywicielskiej i kiełkujących, chociaż należy zauważyć, że askospory nie zostały znalezione we wszystkich gatunkach mączniaka prawdziwego. Powstaje jedna lub dwie rurki zarodnikowe, które działają jako narzędzie penetracji. Grzyb bezpośrednio penetruje ścianę komórkową gospodarza poprzez aktywność enzymatyczną i ciśnienie turgorowe. Po rozpadzie grzyb rozwija haustorium, które dostarcza mu składników odżywczych.

Mączniak prawdziwy rozmnaża się zarówno bezpłciowo, jak i płciowo. Rozmnażanie bezpłciowe rozpoczyna się w ciągu kilku dni od zakażenia. Konidiofory wyłaniają się ze strzępek wegetatywnych, a konidia są produkowane seryjnie. Konidia są następnie rozpraszane przez wiatr na stosunkowo niewielkie odległości.

Po zakończeniu bezpłciowego sezonu wegetacyjnego następuje rozmnażanie płciowe poprzez chasmothecia, które są małymi, okrągłymi owocnikami zawierającymi asci, wyspecjalizowane woreczki, w których wytwarzane są askospory. Gdy jądro z męskiej gametangii przenosi się do żeńskiej gametangii poprzez plazmogamię, powstaje komórka dikariotyczna, z której rozwijają się zarodnie. Liczba askospor na askus waha się w zależności od gatunku od dwóch do ośmiu. W sprzyjających warunkach chasmothecia otwiera się i uwalnia askospory.

Grzyby mączniaka prawdziwego zimują w kilku formach - chasmothecia, perennacja pąków i grzybnia stają się ponownie aktywne, gdy wiosną powracają sprzyjające warunki.